C18色譜柱需要怎么清洗?
更新時(shí)間:2022-11-26 點(diǎn)擊次數(shù):949次
在高效液相色譜分析系統(tǒng)中,對(duì)C18色譜柱溫度控制的要求越來(lái)越高。正確的控制色譜柱的溫度對(duì)于提高柱效、改善峰分離度、保證重現(xiàn)性、以達(dá)預(yù)期的分析結(jié)果,具有不容忽視的作用。
強(qiáng)極性和堿性化合物、藥物、抗生素、肽和蛋白質(zhì)。
性能優(yōu)點(diǎn):
1、使用高純度的硅膠基質(zhì);
2、較好的再現(xiàn)性;
3、流動(dòng)相可以使用100%水溶液的高效液相色譜柱;
4、對(duì)親水性化合物的保留強(qiáng);
5、對(duì)于堿性化合物分離良好。
C18色譜柱需要怎么清洗?
一般反相色譜,經(jīng)常會(huì)用到緩沖鹽。而百鹽對(duì)于色譜柱傷害比較大。如果鹽堵在色譜柱里面那柱子就廢了。所以需要把它沖掉。最好是每次都沖掉。
如果你的柱子流動(dòng)相里面沒有鹽,那就沒必要沖洗了。
沖洗方法:反相柱子最好保存度在純甲醇或者純乙腈里面,但是鹽不溶于純有機(jī)相。所以中間過(guò)渡甲醇水或者乙腈水。
究竟用什么,要看你的流動(dòng)相。
比如,我用的是磷酸鹽緩沖液-乙腈(70:30)的流動(dòng)相,那么沖洗的時(shí)候最好選用10%-15%乙腈水,沖洗1.0ml/min,至少30min,最好40min。
如果第二天接著使用的話可以不*純甲回醇或者純乙腈封存了。如果第二天不用,最好用純的有機(jī)相封上柱子,同樣是1.0ml/min流速?zèng)_洗30min。
另,也不是說(shuō)不清洗就會(huì)壞。我們研發(fā)有的時(shí)候?yàn)榱粟s項(xiàng)目,來(lái)不及沖洗色譜柱。柱子不會(huì)怎么樣。就是壽命會(huì)短一點(diǎn)而已。